96孔PCR儀是一種用于進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的實驗設(shè)備，能夠同時對96個樣品進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。它廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷、基因研究等領(lǐng)域，為科研人員提供了高效、便捷的實驗工具；通過控制溫度的變化，使DNA在變性、退火、延伸等步驟中進(jìn)行循環(huán)復(fù)制，從而實現(xiàn)特定DNA片段的快速擴(kuò)增。在實時熒光定量PCR儀中，還能在擴(kuò)增過程中實時監(jiān)測熒光信號，對目標(biāo)基因進(jìn)行定量分析。
 

　　96孔PCR儀的結(jié)構(gòu)組成：
 

　　-熱循環(huán)系統(tǒng)：是PCR儀的核心部件，能夠準(zhǔn)確控制反應(yīng)體系的溫度變化，確保PCR反應(yīng)的各個階段在合適的溫度下進(jìn)行。其加熱和冷卻速度較快，可有效縮短PCR循環(huán)周期時間，提高實驗效率。
 

　　-樣本支持系統(tǒng)：通常配備96孔的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)板，用于放置待擴(kuò)增的樣品。這種標(biāo)準(zhǔn)化的設(shè)計使得樣品的處理和操作更加方便，也便于與其他實驗設(shè)備和試劑進(jìn)行配套使用。部分PCR儀還支持不同類型的反應(yīng)板，如384孔板等，以滿足不同規(guī)模實驗的需求。
 

　　-熒光檢測系統(tǒng)：在實時熒光定量PCR儀中，熒光檢測系統(tǒng)用于監(jiān)測反應(yīng)過程中的熒光信號。它包括激發(fā)光源、光路傳輸系統(tǒng)和熒光檢測器等。光學(xué)系統(tǒng)能夠保證高光密度與一致的導(dǎo)光距離，消除光學(xué)邊緣效應(yīng)，提高檢測的準(zhǔn)確性和靈敏度。

 

　　96孔PCR儀的使用注意事項：
 

　　1.儀器操作方面
 

　　-開機(jī)順序：先打開電腦，再打開定量PCR儀底座開關(guān)，最后啟動配套的軟件，避免因開機(jī)順序不當(dāng)導(dǎo)致儀器無法正常啟動或出現(xiàn)故障。
 

　　-禁止人為干擾：部分PCR儀上部有蓋的部分為全自動控制，在通電狀態(tài)下嚴(yán)禁任何形式人為干擾上蓋開啟或者關(guān)閉的行為，否則會導(dǎo)致上蓋故障，影響儀器的正常使用。
 

　　-定期維護(hù)：按照儀器的使用說明書，定期對PCR儀進(jìn)行清潔、校準(zhǔn)和維護(hù)，確保儀器的性能穩(wěn)定和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 

　　2.實驗操作方面
 

　　-防止污染：整個實驗過程要在無菌、無核酸酶污染的環(huán)境中進(jìn)行，避免外界因素對實驗結(jié)果的影響。實驗前要對實驗室進(jìn)行消毒和清潔，實驗過程中要佩戴一次性手套、口罩和帽子等，防止雜質(zhì)和微生物進(jìn)入反應(yīng)體系。
 

　　-準(zhǔn)確加樣：使用移液器加樣時，要確保移液器的準(zhǔn)確性和精度，定期對移液器進(jìn)行校準(zhǔn)。加樣過程中要避免氣泡產(chǎn)生，以免影響反應(yīng)體系的體積和成分，導(dǎo)致實驗結(jié)果不準(zhǔn)確。
 

　　-避免交叉污染：在取樣和加樣的過程中，需要使用不同的移液器和吸頭，避免不同樣品之間的交叉污染。同時，要注意PCR板和封板膜的清潔，防止殘留的樣品或試劑對其他孔造成污染。
 

　　-貼膜規(guī)范：使用封板膜時，要注意撫平封板膜，避免產(chǎn)生氣泡，影響熒光信號的檢測。并且要確保封板膜覆蓋PCR板的各個孔，防止液體蒸發(fā)。
 

　　3.試劑與耗材方面
 

　　-試劑質(zhì)量：確保使用的PCR試劑質(zhì)量可靠，在有效期內(nèi)使用。不同廠家、不同批次的試劑可能會對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響，因此在使用前最好進(jìn)行預(yù)實驗，以選擇合適的試劑。
 

　　-耗材選擇：選用質(zhì)量好、透明度高、無熒光背景干擾的96孔PCR板和光學(xué)級封板膜，以保證熒光信號的檢測效果。同時，要注意PCR板的平整度和孔的均一性，避免因PCR板的質(zhì)量問題導(dǎo)致實驗結(jié)果不準(zhǔn)確。